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      麥康凱瓊脂培養(yǎng)基介紹

      更新時間:2025-05-07 瀏覽次數(shù):3062

      麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacConkey Agar,MAC)全面解析

      一、基本介紹

      麥康凱瓊脂培養(yǎng)基是一種選擇性及鑒別性培養(yǎng)基,由Alfred Theodore MacConkey于1905年研制,主要用于腸道致病菌的分離與鑒定。其核心設(shè)計邏輯為:

      • 選擇性抑制:通過膽鹽抑制革蘭氏陽性菌(如葡萄球菌、鏈球菌),但允許部分腸球菌及沙門氏菌生長;

      • 鑒別功能:利用乳糖發(fā)酵差異,通過指示劑顏色區(qū)分細(xì)菌代謝特性。

      二、核心成分與配方


      成分作用機(jī)制
      蛋白胨、脙胨提供碳源、氮源、維生素及生長因子,支持細(xì)菌基礎(chǔ)代謝。
      膽鹽(豬/牛/羊)抑制革蘭氏陽性菌,但對沙門氏菌、志賀氏菌等腸道致病菌抑制較弱。
      乳糖作為發(fā)酵底物,分解產(chǎn)酸(如大腸埃希菌)或不分解(如沙門氏菌)。
      中性紅pH指示劑,發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸時菌落呈桃紅色,并形成膽鹽沉淀環(huán)。
      結(jié)晶紫增強(qiáng)對革蘭氏陽性菌(如腸球菌、葡萄球菌)的抑制,減少干擾。
      氯化鈉維持滲透壓平衡,確保細(xì)菌正常生長。
      瓊脂凝固劑,形成固體培養(yǎng)基表面。


      典型配方(每升)

      • 蛋白胨 20g、乳糖 10g、氯化鈉 5g、膽鹽 5g、中性紅 0.03g、瓊脂 14g,pH 7.2±0.2。

      三、作用機(jī)制與鑒別原理

      1. 選擇性抑制

        • 膽鹽破壞革蘭氏陽性菌細(xì)胞膜,抑制其生長;

        • 結(jié)晶紫進(jìn)一步增強(qiáng)對腸球菌和葡萄球菌的抑制,但沙門氏菌等腸道菌可耐受。

      2. 乳糖發(fā)酵鑒別

        • 發(fā)酵乳糖菌(如大腸埃希菌):產(chǎn)酸使菌落呈桃紅色,周圍形成膽鹽沉淀環(huán)(因酸與膽鹽反應(yīng))。

        • 不發(fā)酵乳糖菌(如沙門氏菌、志賀氏菌):菌落無色或淡黃色,無沉淀環(huán)。

        • 遲緩發(fā)酵菌(如宋內(nèi)志賀氏菌):菌落中心偏紅,邊緣無色。

      四、應(yīng)用場景

      1. 臨床檢驗

        • 糞便、分泌物中腸道致病菌(沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉性大腸桿菌)的分離;

        • 腸球菌的篩選與鑒定。

      2. 科研應(yīng)用

        • 耐藥菌株篩選(如添加壯觀霉素篩選鴨源沙門氏菌);

        • 菌株融合研究(如通過抗藥性標(biāo)記篩選融合菌株)。

      3. 特殊改良配方

        • 低鹽MAC:減少氯化鈉以抑制變形桿菌蔓延生長;

        • 山梨醇MAC:替換乳糖用于分離O157大腸埃希氏菌(不發(fā)酵山梨醇);

        • 含抗生素MAC:添加氨芐青霉素、多粘菌素B等篩選特定耐藥菌。

      五、制備方法

      1. 配制

        • 稱取54g培養(yǎng)基干粉溶于1L蒸餾水,加熱煮沸至溶解。

      2. 滅菌

        • 分裝后121℃高壓滅菌15分鐘,滅菌后搖勻防止瓊脂沉積。

      3. 傾注平板

        • 冷卻至50-55℃時加入滅菌的結(jié)晶紫和中性紅溶液,混勻后傾注平板。

      六、使用注意事項

      1. 樣本處理

        • 糞便、分泌物等可直接接種,固體樣本需稀釋后涂布。

      2. 培養(yǎng)條件

        • 35-37℃培養(yǎng)18-24小時,觀察菌落顏色與形態(tài)。

      3. 結(jié)果解讀

        • 結(jié)合生化試驗(如吲哚試驗、氧化酶試驗)和血清學(xué)試驗進(jìn)一步鑒定。

      4. 局限性

        • 某些特殊需求菌株(如嚴(yán)格厭氧菌)可能無法生長;

        • 需定期驗證培養(yǎng)基性能(如接種大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌驗證選擇性)。

      七、總結(jié)

      麥康凱瓊脂培養(yǎng)基通過膽鹽抑制與乳糖發(fā)酵指示,實現(xiàn)了對腸道致病菌的高效分離與鑒別。其成分可調(diào)、用途廣泛,是臨床微生物檢驗和科研中的工具。隨著研究深入,改良配方不斷拓展其應(yīng)用場景,為微生物學(xué)研究提供了有力支持。


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